Которое может в определенный срок (30 минут) и при одинаковой температуре (38°) расщепить 1 мг крахмала до декстрина, не окрашивающегося йодом.
Методика выполнения. Перенумеровать 12 пробирок. В первую пробирку налить 2 мл содержащего фермент раствора (моча, сыворотка , дуоденальный сок - см. ниже), а в остальные 11 пробирок - по 1 мл 1% раствора хлористого натрия. Затем из первой пробирки перенести 1 мл во вторую пробирку, встряхнуть, из второй пробирки - 1 мл в третью пробирку и т. д. вплоть до 12-й пробирки. 1 мл жидкости, взятой из последней пробирки, вылить. Таким образом получится серия последовательных разведений, причем в каждой пробирке будет содержаться половинное по сравнению с предыдущей пробиркой количество фермента .
Первую пробирку исключают из подсчета. В остальные пробирки, от 2-й до 12-й, прибавляют по возможности быстро (для того, чтобы время воздействия содержащегося в моче фермента было по возможности одинаковым для всех пробирок) по 2 мл 1 % раствора крахмала . После этого все пробирки ставят на 30 минут в водяную баню или в термостат при 38° и затем на несколько минут в очень холодную воду для того, чтобы прекратить действие фермента . Затем в каждую пробирку прибавляют по 2 капли n/50 раствора йода и встряхивают. Пробирки с крахмалом , на который диастаза не подействовала, будут иметь синий цвет, а пробирки с переваренным крахмалом , в зависимости от степени расщепления, - красно-синий (эритро-декстрин), сине-фиолетовый, красно-желтый и желтый цвет. В пробирках с красновато-желтым окрашиванием крахмал расщеплен до ахру-декстрина, который больше не дает реакции с йодом. На нижнюю границу действия фермента в серии разведений указывает первая пробирка сине-красного цвета. Расчет производится следующим образом.
Умножают на 2 число, показывающее степень разведения. Разведение в отдельных пробирках составляет:
Так, например, если девятая пробирка окрашена в сине-красный цвет, то для расчета берут восьмую пробирку (разведение 1: 128). Диастатическая активность на 1 мл раствора, содержащего фермент , = 256 ЕВ.
Оценка. Нормальная моча содержит 16 - 64 ЕВ. Более высокие цифры указывают на заболевание поджелудочной железы или по крайней мере на ее вторичное вовлечение в патологический процесс (заболевания желчного пузыря , пенетрирующие язвы желудка и двенадцатиперстной кишки). Очень высокие цифры, до 6000 ЕВ, находят при некрозе поджелудочной железы .
В норме количество диастазы в сыворотке крови равняется 32 ЕВ, в панкреатическом соке - 256 - 2048 ЕВ, верхняя граница нормы после эфирного рефлекса - 8192 ЕВ.
Примечание. Определение диастазы в кале. 5 г свежего кала растирают в ступке с 20 мл 1 % раствора поваренной соли до гомогенной кашицы и оставляют при многократном перемешивании на 30 минут при комнатной температуре. Затем распределяют кашицу в две центрифужные пробирки и центрифугированием отделяют плотные составные части. В отстоявшейся жидкости обычным способом определяют диастазу по Вольгемуту .
Нормальные величины: 32 - 128 ЕВ.
Определение диастазы в панкреатическом соке производится по этому же способу, однако в этом случае ввиду большого содержания фермента целесообразно взять не 2, а 5 мл 1 % раствора крахмала . Отсчет производят после добавления 1 - 2 капель n/10 раствора йода.
Источники ошибок. Раствор крахмала всегда должен быть свежеприготовленным, и его нужно хранить в холодильнике.
Определение диастазы следует по возможности производить в суточной моче (консервирование толуолом), так как содержание ее в отдельных порциях мочи подвержено значительным колебаниям.
Превышение нормы диастазы, как и понижение её уровня, свидетельствуют о серьезных заболеваниях. Каких именно, стоит поговорить более подробно.
Диастаза - пищеварительный фермент, точнее, их смесь, позволяющая переваривать гликоген, крахмал и другие сложные углеводы. Иначе она называется амилазой. Её задача - разбивать частицы полисахаридов.
Производится фермент в поджелудочной железе, а также в железах слюнных и молочных, в яичниках и яичках, тонком кишечнике. После она попадает в желудочно-кишечный тракт, затем в кровь и в урину. Анализы мочи на диастазу позволяют диагностировать панкреатические недуги и не только. Назначить их могут при появлении синюшного оттенка лица, при болях под ложечкой, урчании в животе и вздутиях, а также при частых приступах тошноты или рвоты. При накоплении фермента возможна интоксикация, а при нехватке пища усваивается хуже.
Нормальным показателем диастазы у взрослых считаются цифры от 20 и до 124 единиц на литр. Различий в зависимости от пола нет, но в разных лабораториях варианты нормы могут немного отличаться. У детей нормальными считаются показатели от 10 ед/л и до 64.
В пожилом возрасте цифры колеблются от 25 и до 160.
При панкреатите уровень диастазы может повыситься до 16 тыс. ед/л. Иногда она увеличивается в 200 (и более) раз. Если лечение начать вовремя, уровень фермента быстро приходит в норму.
Если уровень фермента превышает норму, возможны следующие причины повышения:
Если диастаза наоборот понижена, виновны могут быть следующие явления:
В роли причины понижения уровня фермента может выступить разрушение и отмирание тканей поджелудочной из-за любых причин.
Но не всегда тест дает точную информацию. Есть явления, способные исказить данные. К ним относятся:
Подготовка и сбор по всем правилам позволят узнать самый точный результат. В первую очередь, нужно знать, что диастазу могут измерять как в суточной пробе мочи, так и в двухчасовой.
Чтобы результат был предельно точным, нужно следить, чтобы в контейнер не попали частички менструальной крови, стула, туалетной бумаги, выделений из влагалища и т. д. Не касайтесь контейнера пальцами.
Проба двухчасовая собирается таким же образом, но здесь нужна моча свежая. Лучше всего собирать её утром и нести в лабораторию сразу же. Не менее важно и подготовиться к анализу (хоть суточному, хоть двухчасовому) правильно:
Кроме того, перед анализами нельзя принимать определенные лекарства. К ним относятся:
Впрочем, перед сбором спросите врача, можно ли принимать их, или лучше отказаться. Многое зависит от особенностей анализа. Возможно, что и сам анализ придется сдавать непосредственно в больнице, поэтому все особенности и подробности лучше проговаривать с терапевтом.
Любое превышение нормы (или понижение) может свидетельствовать о проблемах со здоровьем. Для того, чтобы уточнить, придется сдавать повторный анализ. Но насторожить врача могут следующие цифры:
Анализ на диастазу мочи - лишь повод для размышления. Чтобы установить диагноз точно, нужно более серьезное обследование. И все же, сдавать его нужно по всем правилам.
Также вы можете узнать, посмотрев данный видеоролик, о нюансов способов проведения анализа на диастазу, как правильно сдать анализ, а также к чему приведет несвоевременное лечение.
Диастаза (альфа-амилаза) – фермент, который приводит к распаду сложных углеводов (гликогена, амилопектина, амилозы) на простые и легко усваиваемые организмом человека сахара.
Она продуцируется в клетках поджелудочной и слюнных желез. Таким образом, процесс переваривания углеводов начинается уже в полости рта и продолжается в тонком кишечнике.
В норме в плазме крови и моче уровень фермента минимален, в концентрация его в моче пропорциональна плазменной.
Следовательно, повышение содержания амилазы в крови сопровождается ростом ее уровня в моче. Патологии поджелудочной железы могут сопровождаться избыточным проникновением амилазы в кровоток.
При остром панкреатите плазменная концентрация диастазы увеличивается в первые 48 часов от начала заболевания, а затем снижается, в то время содержание ее в моче еще несколько суток остается высоким.
Показания к исследованию
Наиболее часто анализ выполняется у пациентов с подозрением на острый панкреатит. Он доступен уже в приемном покое стационара и является одним из самых простых, быстрых и дешевых методов, который позволяет врачу выявить ряд патологических состояний.
Исследование наиболее информативно в комбинации с другими методами диагностики (определение уровней амилазы и липазы крови, общий анализ крови, УЗИ органов брюшной полости). Анализ мочи на диастазу необходим в следующих случаях:
Чаще всего тест назначают при следующих симптомах:
Сдавать мочу на анализ пациенту необходимо после небольшой подготовки (исключение - ургентные ситуации).
Варианты определения альфа-амилазы в моче:
Референсные (нормальные) значения – 24–400 ЕД. В лабораториях могут быть другие показатели нормы, это всегда нужно уточнять (например, Инвитро -1-17 ЕД/ч, KDL - до 490 МЕ у мужчин, до 450 МЕ у женщин).
Причины отклонений уровня диастазы от нормальных значений представлены в таблице 1.
Таблица 1 - Когда меняется уровень амилазы в моче?
Кроме лекарственных препаратов и болезней превышение нормальных значений может наблюдаться в следующих ситуациях.
Описываемый тест не является специфическим и применяется лишь в сочетании с другими методами диагностики. Небольшое повышение у некоторых людей может быть вариантом нормы.
На результат может повлиять множество внешних факторов (дегидратация, прием препаратов, употребление спиртного). Поэтому после получения результатов необходимо проконсультироваться у лечащего врача. После осмотра пациента могут направить на консультацию хирурга, назначить ряд дополнительных обследований:
Железы внутренней секреции человеческого организма вырабатывают множество ферментов, которые обеспечивают ему бесперебойное выполнение всех необходимых функций. Пищеварительный процесс достаточно длителен и сложен, причем начинается он не в самом желудке, а намного раньше, то есть при попадании пищи в ротовую полость.
За начальный этап расщепления пищи отвечают несколько пищеварительных ферментов, в том числе и альфа-амилаза, который в основном вырабатывается поджелудочной и слюнными железами. Его основной функцией является расщепление углеводов до простых олигосахаридов. Фермент находится в ротовой полости, и именно от его работоспособности зависит расщепление пищи на первичном этапе.
В случае если ферментов и, в частности, амилазы недостаточно, то процесс пищеварения претерпевает сложности на своем начале, в результате чего все дальнейшие этапы будут затруднены, что рано или поздно приведет к развитию различных заболеваний. Для исследования подобных отклонений у пациента берется моча на диастазу (ферменты поджелудочной железы), что является быстрым и простым диагностическим методом.
Альфа-амилаза является одним из самых важных пищеварительных ферментов, включенных в диастазу, который расщепляет крахмал до простых углеводов. Ее синтез происходит также в тонком кишечнике и у женщин в яичниках. Амилаза содержится в слюне, и поэтому пищеварительный процесс начинается именно под ее воздействием.
Исторический факт! Амилаза была открыта в 1833 году Ансельмом Пайеном французским химиком, когда он впервые описал диастазу (смесь ферментов), которая расщепляла крахмал до мальтозы. По другим источникам амилазу открыл К. С. Кирхгоф – академик петербургской научной Академии в 1814 году.
Именно амилаза становится причиной появления сладковатого вкуса при долгом пережевывании продуктов, содержащих крахмал (картофель, рис), но без добавления сахара. При этом активность данного фермента в моче напрямую связана с активностью в сыворотке крови, поэтому для изучения его содержания проводится анализ мочи на диастазу.
По количеству ферментов в исследуемом материале врачу удается сделать вывод о функциональном состоянии поджелудочной железы и выявить присутствие патологий, в частности, панкреатита. Наряду с остальными ферментами, участвующими в пищеварительных процессах, диастаза попадает в желудок, затем в кишечник, оттуда всасывается в кровь, после чего абсорбируется почками и выводится вместе с мочой.
В норме в кровяном русле циркулирует небольшое количество ферментов поджелудочной и слюнных желез (это происходит из-за обновления клеток). Но при повреждении поджелудочной железы, что чаще всего связано с развитием панкреатита либо при блокировке протока железы камнем или новообразованием, ферменты начинают попадать в кровь, а затем в мочу в большем количестве. Это и легло в основу исследования.
Кроме того, учитывая, что, к примеру, амилаза вырабатывается и слюнными железами, то ее увеличившаяся активность в моче может быть вызвана патологиями данных органов. В любом случае подобные изменения не должны оставаться без внимания, а, наоборот, пациенту потребуется пройти полное обследование.
Причин, по которым может назначаться анализ на диастазу, немало, и самыми частыми из них являются:
Кроме этого, определение диастазы в моче назначается при наличии острых болей в животе как взрослым, так и детям, что помогает врачам быстрее выставить диагноз и назначить соответствующую терапию.
Основные характеристики амилазы, как компонента диастазы
Многие ферменты, участвующие в пищеварении, могут изменять свою концентрацию на протяжении суток, поэтому врачи рекомендуют производить сбор мочи на диастазу в утреннее время. Для того чтобы правильно сдавать образец урины, следует изначально проконсультироваться с врачом или медсестрой о тонкостях забора биоматериала. При этом в каждой лаборатории должна быть памятка, которая содержит алгоритм сбора мочи на анализ.
Во-первых, следует приобрести стерильный контейнер в аптеке, специально приспособленный для этих целей. Безусловно, можно воспользоваться обычной стеклянной емкостью, но тогда придется ее тщательно вымыть и простерилизовать, чтобы туда не попали никакие посторонние примеси. Во-вторых, за 24 часа постараться свести к минимуму физическое и психоэмоциональное напряжение.
В-третьих, за сутки исключить употребление алкоголя и мочегонных препаратов, по поводу последних предварительно проконсультировавшись с лечащим врачом. В-четвертых, за день до исследования воздержаться от приема в пищу продуктов, способных изменить цвет мочи (морковь, свекла, черника и т. д.), а также соленой, острой и пряной пищи.
В большинстве случаев врачи рекомендуют сдать мочу теплой, то есть пациенту будет необходимо провести дома туалет половых органов, а забор биоматериала провести в специально отведенной для этих целей комнате, оборудованной в лаборатории. Иногда, в зависимости от показаний, рекомендуется сдавать урину холодной, тогда забор можно произвести и дома.
В отдельных ситуациях может потребоваться собрать мочу на протяжении суток, или, например, не в утреннее, а в другое время суток. Все это будет решать лечащий врач исходя из присутствующей симптоматики и анамнеза пациента. Для стандартного анализа на диастазу достаточно несколько миллиграммов мочи, главное, чтобы собиравший ее строго придерживался всех необходимых правил.
Важно! Образец мочи для анализа на диастазу необходимо как можно быстрее отправить в лабораторию, то есть не позднее одного часа. Это связано с тем, что ферменты способны быстро разрушаться даже при кратковременном хранении, и исследование будет не способно показать достоверный результат.
Учитывая, что составляющие диастазу биологически активные вещества содержатся и в крови, можно провести анализ и данной жидкости организма. Но, как правило, для первичной диагностики обычно достаточно мочи, и если данное исследование показывает отклонения, то следующим будет изучение диастазы в крови.
В случае если пациенту выставляется диагноз «острый панкреатит», то его урину будут исследовать несколько раз в день, приблизительно с интервалом в 3 часа. Благодаря этому, станет возможным производить постоянный мониторинг состояния больного, если под угрозой находится его дальнейшее здоровье или жизнь.
Анализ мочи на диастазу проводят для диагностики патологий поджелудочной железы
Расшифровка данных анализа должна проводиться опытным врачом, желательно профилирующим на эндокринологии или гастроэнтерологии. В своих выводах он опирается на общепринятые нормы, которые имеют небольшие отличия для разных возрастных категорий. При этом норма диастазы в моче у женщин и мужчин одного возраста отличаться не будет.
У взрослых от 17 до 56–60 лет диастаза в моче составляет 10–124 ед/л. Тогда как норма у взрослых людей более старшего возраста будет заключена в интервал 25–160 ед/л. Для детей данный показатель составляет 10–64 ед/л. Все значения выше или ниже указанных границ будут рассматриваться как отклонения, и, по всей вероятности, потребуется проведение дополнительных обследований.
Самые высокие показатели диастазы в моче отмечаются при остром панкреатите или воспалительном процессе поджелудочной железы, при образовании в ней кисты или на начальных стадиях злокачественного процесса. В диагностике данных патологий параметры диастазы играют важную роль – они предоставляют возможность определить заболевания на ранних стадиях.
К примеру, при панкреатите либо опухоли показатель может быть повышен до 128–256 ед/л, что сразу укажет врачу на наличие патологического процесса в тканях органа. Увеличение значений, но не более чем в 10 раз, нередко отмечается при воспалении слюнных желез, причиной которого стал паротит, а также при холецистите (воспалении желчного пузыря).
И также возрастают показатели диастазы при острых патологиях почек инфекционной природы, таких как гломерулонефрите, пиелонефрите, которые способны приводить к обратимой почечной недостаточности. При почечной недостаточности необратимого характера показатели диастазы в моче всегда повышены.
Менее распространенные причины увеличения значений пищеварительных ферментов следующие:
Кроме вышеперечисленного, значительно повышенные показатели диастазы могут наблюдаться при беременности, протекающей с токсикозом, а также у лиц, страдающих алкоголизмом.
Причины снижения активности диастазы в моче:
Внимание! У ребенка в первые 2 месяца жизни активность диастазы довольно низкая, и она увеличивается до уровня взрослого человека только по достижению им первого года.
При помощи анализа мочи на диастазу паротит можно выявить на ранних стадиях
На полученные данные может оказывать влияние прием некоторых препаратов таких, как кортикостероидные гормоны, противосвертывающие и мочегонные средства (Фуросемид), Ибупрофен, Каптоприл и наркотические анальгетики. Кроме этого, повышение значений диастазы может наблюдаться у беременных женщин на любом сроке вынашивания, что связано с общей перестройкой гормонального фона.
И также повлиять на данные анализа может употребление алкогольсодержащих напитков накануне исследования, потому что его компоненты губительно действуют на клетки поджелудочной железы, разрушая их. В связи с этим ферменты выделяются в кровоток, и затем транспортируются в мочу. Иногда попадание слюны в образец может привести к недостоверным результатам, к примеру, при разговоре, чихании, кашле неподалеку от открытого контейнера с мочой.
Может сказаться на исследовании недавнее проведение рентгенологического исследования желчевыводящих протоков, выполненное с использованием контрастного вещества. Второе название данной диагностики звучит как этопическая ретроградная холангиография.
Пациентам . Анализ мочи на диастазу – быстрый способ проверить, все ли в порядке с поджелудочной и слюнными железами. Главное – тщательно ознакомиться со всеми тонкостями проведения исследования и подготовки к нему, учесть все моменты, которые могут стать причиной получения недостоверных результатов.
На диастазу – это такой способ определения уровня содержания ферментов поджелудочной железы.
Такие ферменты играют важную роль в расщеплении крахмала и других углеводов, и основным элементом в данном случае является вещество под названием диастаза.
Диастаза (альфа-амилаза) синтезируется в поджелудочной и слюнной железах, а также в слизистой оболочке тонкого кишечника (у женщин такие ферменты дополнительно формируются в яичниках).
При нехватке такого фермента происходит неполное расщепление крахмала , который скапливается в организме или частично выводится.
Такие отложения могут провоцировать развитие различных патологических процессов.
В процессе установления уровня диастазы в лаборанты используют специальные реактивы (толуол, буферный раствор фосфата, 0,85%-раствор крахмала и физиологический раствор).
Физиологический раствор берется в количестве 70 граммов и доводится до кипения, после чего 3 миллилитра этого вещества наливают в отдельную стерильную пробирку и смешивается с одним миллилитром раствора крахмала.
После тщательного перемешивания смесь выливается в емкость с закипевшим физраствором препарат остывает и переливается в другую колбу до обозначенной на ней отметки. Далее в эту же колбу добавляется по 10 миллилитров буферного раствора и толуола.
Последний этап – приготовление раствора йода (йод разбавляется с водой в соотношении 2:8, всего должно получиться 100 миллилитров средства).
Затем в 14 пробирок , установленных в штативе, добавляется по миллилитру физраствора, в первую чистую пробирку и в одну из пробирок с физраствором при этом добавляют мочу обследуемого. После этого содержимое второй и третьей пробирок смешивается, и далее манипуляции повторяются для всех пятнадцати пробирок.
В результате в каждой из последующих емкостей концентрация мочи пропорционально уменьшается, а из последней пробирки выливают один миллилитр содержимого, чтобы количество жидкости во всех емкостей было одинаковым.
Анализ мочи на диастазу – способ распознать различные патологии , которые могут сопровождать следующие заболевания:
С помощью такого метода можно узнать практически обо всех заболеваниях поджелудочной железы.
Для исключения ошибки при расшифровке анализов необходимо правильно собрать мочу.
Для этого необходимо строго придерживаться следующих правил :
Для взрослых пациентов и детей старшего возраста такая процедура не представляет сложности, но сбор мочи у грудничков может стать настоящей проблемой, поэтому в таких случаях лучше воспользоваться специальными мочеприемниками
, которые продаются в аптеках.
Если нет возможности приобрести такой аксессуар – можно воспользоваться полиэтиленовым пакетом, проделав в нем отверстия для ног и надев на него пакет на манер подгузника.
Отжимать мочу из самого подгузника нельзя, так как реагенты, содержащиеся в нем, существенно меняют состав мочи, и результаты анализов будут недостоверными.
Вне зависимости от возраста пациента необходимо собрать как минимум 20 миллилитров мочи . Такого количества будет достаточно для проведения исследований на диастазу.
Как правильно собрать мочу по Зимницкому читайте в нашей статье .
После того, как лаборанты проделывают вышеописанные манипуляции с пятнадцатью пробирками, в каждую из них добавляют по два миллилитра крахмала и оставляют емкости на двадцать минут в водяной бане, температура которой не должна превышать 45 градусов .
В течение этого времени происходят необходимые реакции, а затем весь штатив с лабораторной посудой окунают в холодную воду: в этом случае все реакции прекращаются .
Далее во все пробирки закапывается небольшое количество йода, и цвет содержимого меняется на желтый, красный, синий или фиолетовый. Расшифровка результатов происходит на основе того факта, что для каждого цвета характерны определенные результаты.
Так, при синем окрасе можно говорить об отсутствии диастатического действия (переваривание и расщепление крахмала).
И лаборант переходит к пробирке, на которой это действие окончилось, например, если синяя жидкость – в пробирке под номером 6, то специалист переходит к пятой пробирке, в которой при соотношении компонентов 1:16 реакции проходят, а 32 миллилитра крахмала перевариваются в одном миллилитре мочевой жидкости.
В итоге получается уровень диастазы у пациента, сдавшего эту порцию урины, равен 32 единицам и это является нормой .
В зависимости от возраста показатель уровня диастазы, который обозначается буквой «d», может варьироваться от 10 до 124 в возрасте с 17 до 60 лет.
У людей старшей возрастной группы немного завышенные показатели тоже считаются нормой (если речь идет о диапазоне в 25-160 единиц ). Для (с момента рождения и по достижении 17-летнего возраста) нормальным считается уровень от десяти до 64 единиц .
Вне зависимости от возраста пациента пониженные результаты исследований диастазы всегда говорят о почечной недостаточности или сахарном диабете. Если же показатели завышены – можно сделать вывод о протекании в организме воспалительных процессов.
Анализ мочи на диастазу – достаточно старый и проверенный метод, который позволяет установить наличие таких заболеваний, как язва желудка, колит и панкреатит.
Также этот вид анализов собирается при поступлении пациентов в больницу с подозрением на аппендицит . Несмотря на простоту этого метода, он позволяет увидеть некоторые отклонения, о которых может не подозревать сам больной, и потому такое исследование до сих пор актуально.
Основные показатели диастазы и причины нарушения ее уровня — смотрите видео:
